真皮层（dermis）
真皮层由结缔组织构成，厚度约为 0.3-3mm，依各部位厚度略有不同，真皮层位于表皮层下方、皮下组织上方，为皮肤重要的支撑组织，由外而内可分为乳头层和网状层，其中含有腺体、血管、肌肉纤维、神经末梢及毛囊，还拥有具有免疫吞噬功能的组织细胞，且包含痛觉、压觉、触觉及冷热的感觉神经都位于真皮层中。
乳头层（papillary layer）
乳头层位于真皮上层，由薄而疏松的胶原纤维及弹力纤维等结缔组织所构成，厚度约为表皮的 2 倍左右，具有锥体形状的弹性组织突起（乳突），在两层之间形成波浪状，此波浪状的结构使皮肤拥有弹性及伸缩性，真皮层在表皮那侧凸起的部分称为乳头层，表皮突起的部分称为表皮突起，作用在于让表皮层与真皮层可以紧密结合。随着皮肤老化，波浪状结构会逐渐消失，皮肤也就因此松弛而失去弹性。
乳头层内遍布微血管且富含细胞及黏附分子，用以接收来自表皮细胞的讯息分子并适切的调整其组成及结构；乳头层内尚有对触觉敏感的神经末梢－－－梅斯纳氏小体(Meissner’s corpuscles)。
网状层（reticular layer）
由弹性纤维及胶原纤维构成，是决定皮肤厚度的主要肤层，厚度约为表皮层的 10倍，为致密结缔组织，也是真皮中最厚的一层，与乳头层并无明显分界。主要是粗壮平行的胶原纤维及交织其中的弹力纤维组成网状，越靠近皮下脂肪的纤维越粗壮。
胶原纤维最主要的功能是维持皮肤的架构，且能使皮肤柔软、具伸展及收缩性，一旦胶原蛋白退化、松弛，皮肤就会出现皱纹，即老化的现象；弹性纤维则给予皮肤弹力、保持皮肤的韧性。
